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        色譜常見使用問題的詳細解答

        更新時間:2016-03-09      點擊次數:3227

        問:用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決?
          ( 答:關于漂移問題:
          1、溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定
          2、流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等
          3、柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡
          關于快速變化問題
          1、流速發生變化,解決辦法是重新設定流速,使之保持穩定
          2、泵中有氣泡,可通過排氣等操作將氣泡趕出。
          3、流動相不合適,解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合
          問:色質聯用中毛細柱的選擇應注意什么問題?
          答:1、柱效要高
          2、熱穩定性好
          化學惰性強
          具體選擇應注意
          1、柱極性。根據分析樣品選擇不同極性的柱子進行分析
          2、柱子內徑。內徑大小決定柱容量
          3、液膜厚度。分析樣品溫度一不一樣,對膜厚有不同要求,溫度高液膜要厚,溫度低液膜要薄
          4、柱長度。柱越長,柱效越高,分離效果越好,但也存在吸附問題,柱子過長,分析時間長,因此要根據樣品考慮柱子長度
          5、外涂層(柱體)的選擇
          6、另外還有儀器型號、分析對象等因素
          問:液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什么?
          答:1、篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。
          2、存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子
          ( 問:從那些方面可以簡單判別毛細管柱子的熱穩定性好壞?
          答:1、分配容量(或容量因子)K,好的柱子在高溫運行后,分配容量K不應有明顯的下降,否則,說明柱子的熱穩定性不好。
          2、理論塔板數n,熱穩定性好的柱子經受高溫后,理論塔板數應基本保持恒定
          3、柱子的極性。熱穩定性好的柱子,高溫前后極性變化不大,具體表現為保留指數I值沒有大的變化。
          4、噪聲。熱穩定性好的柱子在高溫下使用后,噪聲不能增加.
          5、柱子的去活層,毛細管柱子涂固定液前內部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質量好的毛細管柱子高溫后,去活層
          不應該變化,表現在對強極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。

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